光诱导对人视网膜色素上皮细胞自噬和凋亡的影响

摘要：

目的：:研究人视网膜色素上皮（RPE）细胞光损伤中自噬与凋亡之间的关系，并探讨自噬抑制剂3甲基腺嘌呤（3MA）对光诱导下RPE细胞自噬和凋亡的影响。方法：:实验研究。将体外培养的人RPE细胞（ARPE-19）随机分为12 h对照组、12 h模型组、12 h 3MA组以及24 h对照组、24 h模型组、24 h 3MA组。对照组采用锡纸包裹避光培养；模型组接受光照刺激；3MA组中加入3 mmol/ml 3MA后接受光照刺激，以自制三基色LED（发光二极管）冷光灯作为光源，在（16 500±500）lx光照强度下照射细胞12 h和24 h。透射电子显微镜观察每组细胞超微结构，流式细胞仪测定细胞存活率，激光共聚焦结合倒置荧光显微镜定性、定量分析自噬-溶酶体形态及荧光强度，Western blot法检测Beclin 1、LC3和P62自噬相关蛋白表达量。数据采用单因素方差分析。结果：:在光照12 h后，ARPE-19细胞自噬水平可以抵抗光损伤，降低细胞凋亡率（
F=931.53，
P<0.001）；光照24 h后细胞自噬水平超过其正常调节范围，细胞凋亡率升高，差异有统计学意义（
F=1156.67，
P<0.001）；使用3MA可抑制光诱导的ARPE-19细胞过度自噬，降低细胞凋亡率（
F=2.856，
P=0.027），进而保护细胞以应对光损伤。
结论：:ARPE-19自噬水平随光照时间而变化；随着光照时间延长，细胞凋亡率升高。抑制细胞的过度自噬可以保护ARPE-19细胞应对光损伤。

关键词：年龄相关性黄斑变性、视网膜色素上皮细胞、光损伤、3甲基腺嘌呤、自噬、凋亡

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资助基金：国家自然科学基金82060885;宁夏自然科学基金2020AAC03172;宁夏高等学校科学研究项目NGY2018-99;National Natural Science Foundation of China82060885;Ningxia Natural Science Foundation2020AAC03172;Ningxia Scientific Research Program for Institution of Higher EducationNGY2018-99

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：728-735