DZNep靶向EZH2抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖

摘要：

目的：:探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A（DZNep）对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法：:实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞（UM95、UM96）和葡萄膜黑色素瘤细胞（M23、SP6.5）中的表达，然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理，作为实验组；以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平，细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本
t检验进行比较。
结果：:EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高（
t=25.050，
P=0.002；
t=14.220，
P=0.005）。MTS结果显示，DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性，呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比，实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低（
t=3.364，
P=0.015；
t=6.997，
P<0.001），并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少（
t=5.117，
P=0.002；
t=3.399，
P=0.015）。流式细胞术检测结果显示，与阴性对照组相比，实验组中M23和SP6.5细胞处于G1期的细胞比例均显著升高（
t=6.199，
P=0.003；
t=3.729，
P=0.020）。Western blot检测结果显示，与阴性对照组相比，实验组M23和SP6.5细胞中的EZH2（
t=5.214，
P=0.035；
t=13.530，
P=0.005）、p-Rb（
t=4.551，
P=0.045；
t=4.655，
P=0.043）、E2F1（
t=8.090，
P=0.015；
t=9.313，
P=0.011）以及p-ERK（
t=4.819，
P=0.040；
t=8.951，
P=0.012）表达均有降低，H3K27me3修饰水平显著下降（
t=5.257，
P=0.034；
t=5.697，
P=0.030）。
结论：:DZNep能够抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖，具有治疗葡萄膜黑色素瘤的应用前景。

关键词：葡萄膜黑色素瘤、EZH2、3-deazaneplanocin A、细胞增殖

所属期刊栏目：22

资助基金：浙江省自然科学基金LQ17H120009;Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of ChinaLQ17H120009

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：492-499