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10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2019.09.001

AAV介导的EPO基因下调对CNV的抑制作用

引用
目的:研究腺相关病毒(AAV)介导的促红细胞生成素(EPO)shRNA靶向视网膜色素上皮(RPE)的EPO表达水平下调对脉络膜新生血管(CNV)进展的影响,以期发现潜在的湿性年龄相关性黄斑变性(nAMD)的治疗靶点.方法:实验研究.在HEK293T细胞内对包含EPOshRNA片段的AAV质粒进行验证(采用Student's t检验).选用2个月龄C57/B6J小鼠10只,右眼作为实验组,视网膜下注射AAV1-sCBA-GFP-EPO-shRNA;左眼作为对照组,视网膜下注射AAV1-sCBA-GFP.注射后3周,进行激光诱导的CNV造模,造模后拍摄眼底照片确认病毒转染及造模情况,造模后15 d RPE铺片以测算CNV面积大小,并用Student's t检验方法进行组间比较.结果:EPO shRNA在HEK293T细胞内对EPO表达的下调效率为69.6%,且与对照组相比差异具有统计学意义(t=6.080,P=0.022).眼底照片显示,注射了AAV的小鼠造模成功;视网膜有点状的绿色荧光蛋白表达,证实病毒转染成功.造模后15 d,RPE铺片显示实验组的平均CNV面积与对照组相比小44.7%(t=4.279,P=0.001).结论:AAV介导的EPO shRNA对CNV的发生和发展起到显著的抑制作用,在未来可能作为nAMD的新治疗方法.

腺相关病毒、脉络膜新生血管、促红细胞生成素、年龄相关性黄斑变性

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国家自然科学基金81371040,81770934;国家重点研发计划2017YFC0111300 National Natural Science Foundation of China81371040, 81770934;The National Key Research and Development Program of China2017YFC0111300

2019-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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