法舒地尔对大鼠急性高眼压视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

摘要：

目的 观察法舒地尔对大鼠急性高眼压视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用并探讨其机制.方法 实验研究.24只SD大鼠被随机分入正常组(N组)、模型组(M组)、模型+磷酸缓冲液组(MP组)、模型+法舒地尔组(F组),正常组不做任何处理,后三组制作急性高眼压模型(生理盐水灌注法).其中MP组和F组于造模前1周、当天及其后每天分别腹腔注射磷酸缓冲液(PBS) 25 mg/kg和法舒地尔25 mg/kg,各组于造模后7 d取眼球和心脏血,采用TUNEL法测定RGCs凋亡指数(AI)反映RGCs凋亡情况,免疫组化法观察各组视网膜中Rho激酶-2(ROCK-2)和内皮素(ET-1)的分布,并用吸光度值(OD)反映各自表达量;采用Western blotting法测定各组视网膜中磷酸化的肌球蛋白磷酸酶靶单位(p-MYPT-1)的表达,放射免疫法测定血浆中ET-1含量,血液流变仪测量不同剪变率下的全血黏度、红细胞聚集指数(BCAI)和红细胞压积(HCT).各指标组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 各组RGCs AI差异具有统计学意义(F=402.041,P=0.000),其中F组RGCs AI为33.3%±2.0%,少于M组(64.3%±2.2%)或MP组(62.5%±2.2%)(P<0.05).N组视网膜的节细胞层(GCL)中仅散在几个ROCK-2和ET-1阳性细胞,M、MP和F组ROCK-2阳性细胞分布于GCL、内丛状层(IPL)、内核层(INL)、外丛状层(OPL)和外核层(ONL)中,而ET-1阳性细胞分布于前4层,ONL中无表达,且两者在M和MP组中的OD值高于N组(N、M及MP组ROCK-2:0.21±0.03、0.52±0.06、0.54±0.03;ET-1:0.22±0.05、0.51±0.03、0.51±0.04)(P均<0.01),F组OD值(ROCK-2:0.37±0.04;ET-1:0.35±0.06)低于M或MP组(P均<0.05),但仍高于N组(P均<0.05).ROCK-2和ET-1在各组表达差异具有统计学意义(F=82.862、56.491,P=0.000).Western blotting检测发现各组视网膜中P-MYPT-1表达差异具有统计学意义(F=606.236,P=0.000),M和MP组表达量分别为0.522±0.013和0.520±0.013,高于N组(0.263±0.014)(P<0.01),F组表达量(0.302±0.015)低于M或MP组(P<0.05),但仍高于N组(P<0.05).放射免疫法检测发现各组血浆ET-1含量差异有统计学意义(F=8.750,P=0.000),M和MP组含量均为(96±10)pg/ml,高于N组[(72±10)pg/ml](P<0.05),F组含量为(78+10)pg/ml,低于M或MP组(P<0.05),但仍高于N组(P<0.05).血液流变仪检测发现各组低切、中切、高切状态下全血黏度,BCAI和HCT差异有统计学意义(F=7.086、4.279、14.780、37.351、143.264,P均<0.05),且各指标中M或MP组较N组高(P<0.05),F组较M或MP组低(P<0.05),但仍高于N组(P<0.05).结论 法舒地尔可以抑制大鼠急性高眼压模型中RGCs的凋亡,对RGCs有保护作用,推测其机制可能与抑制ROCK-2、减少p-MYPT-1、减少肌动蛋白-肌球蛋白交联、抑制平滑肌收缩、减少缩血管因子ET-1表达、降低血黏度有关.

关键词：神经保护药、rho相关激酶、视网膜神经节细胞、眼内压、模型、动物、大鼠

所属期刊栏目：13

分类号：R775(眼科学)

在线出版日期：2011-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：191-197