野生型和突变型小鼠前体mRNA加工因子31基因克隆及真核表达载体的构建

摘要：

目的 构建野生型和突变型小鼠前体mRNA加工因子31(pre-mRNA processing factor 31,PRPF31)基因的真核表达载体.方法 通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增小鼠PRPF31野生型全长编码序列、体外定点突变获得331del12突变型PRPF1的cDNA编码序列,将上述两序列分别克隆入pGEM-T Easy载体,经限制性内切酶Nhe Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后,再克隆入pTracer-CMV真核表达载体,予DNA测序鉴定.结果 PCR成功扩增出野生型和突变型PRPF31基因,DNA序列分析证实两种基因的真核表达载体构建成功.结论 野生型和突变型PRPF31基因真核表达载体的构建,为研究PRPF31基因突变引起视网膜色素变性的机制奠定了基础.

关键词：前体mRNA加工因子31、基因克隆、真核表达载体、视网膜色素变性、小鼠、逆转录聚合酶链反应/方法

所属期刊栏目：8

分类号：R774.12(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30070805

在线出版日期：2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：236-239