东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化

摘要：

目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件.方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体.表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达.采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度.结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5％、诱导时间为72 h、诱导温度为28℃,在此条件下表达产物SDS-PAGE电泳条带灰度值为117,抑菌环直径为28.16 mm,可为规模化的抗菌肽表达提供参考数据.

关键词：抗菌肽、毕赤酵母、表达条件

所属期刊栏目：34

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家级大学生创新项目091022508;国家自然科学基金项目30870301;黑龙江省自然科学基金重点项目ZJN0604-02

在线出版日期：2013-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：32-36