miR-148 a下调Livin促进卵巢癌OVCAR-3细胞的凋亡

摘要：

目的 观察高表达miR-148a对卵巢癌细胞系-3(OVCAR-3)细胞增殖及凋亡的影响,并深入研究miR-148a对凋亡抑制蛋白(Livin)基因的作用机制.方法 2016年10月—2017年12月在第四军医大学西京医院妇产科实验室进行实验.向培养的OVCAR-3细胞培养基中加入阴性对照(NC组)或miR-148a mimics(实验组),利用集落形成实验和CCK-8法检测转染miR-148a对OVCAR-3细胞增殖能力的影响;利用流式细胞计数法检测转染miR-148a后OVCAR-3细胞的凋亡情况;利用荧光素酶报告基因系统检测miR-148a对Livin mRNA 3'-UTR区稳定性的影响;利用Real time PCR(RT-PCR)和Western blot法检测Livin及Caspase-3的表达水平.结果 集落形成实验和CCK-8结果显示,与NC组相比,实验组OVCAR-3细胞转染miR-148a后克隆形成率明显下降,细胞增殖受到显著抑制,且呈剂量依赖效应(P<0.05);OVCAR-3细胞转染miR-148a后能显著增加细胞凋亡的水平(P<0.05);荧光素酶报告基因系统结果提示,miR-148a能够与Livin mRNA的3'-UTR区特异性结合;RT-PCR结果和Western blot结果提示转染miR-148a后,Livin表达水平明显降低,而Caspase-3的剪切水平显著升高(P<0.05).结论 miR-148a可以抑制卵巢癌细胞的细胞增殖,促进癌细胞的凋亡增加,其分子机制可能是通过抑制Livin的表达.

关键词：miR-148a:卵巢癌细胞系-3、增殖、凋亡、凋亡抑制蛋白基因

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81302243

在线出版日期：2018-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：927-931