一种gamma-deltaT细胞体外扩增体系的研制

摘要：

目的 建立人单个核细胞培养的体外扩增gamma-delta T细胞体系,为肿瘤免疫细胞治疗奠定基础.方法 采集体检健康人外周血,分离出单个核细胞,接种于含IL-2、 唑来膦酸、IL-18以及牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(GGPP)的体系中.根据加入激活剂种类的不同组合分为五个组,包括A组:唑来膦酸+IL-2;B组:唑来膦酸+IL-2+IL-18;C组:唑来膦酸+IL-2+GGPP;D组:唑来膦酸+IL-2+IL-18+GGPP;E组:不添加任何细胞因子作为激活剂.培养1周后,流式细胞术检测各组gamma-delta T细胞的纯度、 颗粒酶B、 穿孔素及CD56的阳性比例.以K562细胞为靶细胞,MTT实验观察细胞的体外杀伤活性.结果 经过各组合细胞因子诱导7 d后,gamma-delta T细胞纯度均大于70％,细胞因子刺激组各组间gamma-delta T细胞纯度以及扩增倍数无显著差异(P>0.05).经细胞因子刺激组的gamma-delta T细胞的颗粒酶B、 细胞穿孔素以及CD56表达阳性率均显著高于E组,差异具有统计学意义(P<0.05).经体外细胞因子处理后,gamma-delta T细胞不仅增殖数目与速度大大增加,而且一些具有杀伤作用的物质(颗粒酶B、 细胞穿孔素与CD56)也大大增加,说明在细胞因子的参与下体外扩增对于肿瘤细胞的杀伤活性更强,杀伤效果更好.结论 唑来膦酸、IL-2、IL-18、GGPP可作为gamma-delta T细胞体外扩增体系中的重要组成部分,能够显著增强gamma-delta T细胞的毒活性,有效增强肿瘤细胞的杀伤活性.

关键词：Gamma-deltaT细胞、体外扩增、肿瘤过继免疫

所属期刊栏目：25

分类号：R329.2+1(人体形态学)

资助基金：2016年江门市第五批科技计划项目1

在线出版日期：2018-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1301-1303