荧光定量PCR检测结核杆菌PncA基因突变研究

摘要：

目的 运用实时荧光定量PCR方法检测结核分支杆菌耐吡嗪酰胺(PZA)分离株PncA基因突变情况,从而探讨其水平与结核病的临床转归的相关性.方法 用荧光定量PCR Taqman探针技术,以PncA基因片段设计引物,以突变发生率最高的47位(Th广→Ala) (PncA139)和85位(Leu→Pro) (PncA254)设计探针,10倍系列稀释含有目的基因的质粒,进行实时荧光定量PCR反应,建立标准曲线.并用于检测临床105份标本(TB-DNA ＞103)pncA基因突变表达量.结果 ①63例Pn-cA139点突变表达量＞102,占60％;②31例PncA254点突变表达量＞102,占30％;③PncA139位突变表达量＞103的患者同时也出现PncA254位突变表现,且TB-DNA表达量均＞106;④PncA139位突变的高拷贝组与低拷贝组突变率比较x2为50.44,85位点x2为20.97,P值均＜0.005,比较差异亦有明显统计意义.结论 TB-DNA高拷贝且PncA基因突变是临床结核病患者病情反复,以致迁延不愈的原因之一.

关键词：实时荧光定量PCR、结核分支杆菌、吡嗪酰胺、PncA基因突变

所属期刊栏目：20

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省医学科研基金2011321

在线出版日期：2014-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1482-1485