免疫刺激剂CpG ODN防治烟曲霉菌引起的变态反应性结膜炎的实验研究

摘要：

背景研究证实免疫调节剂CpG ODN对蛋白类过敏原引起的变态反应性结膜炎有防治作用,但其对真菌引发的变态反应性结膜炎是否有类似作用尚不清楚.目的研究局部应用CpG ODN是否能够预防或减轻烟曲霉菌引发的变态反应性结膜炎.方法建立烟曲霉菌变态反应性结膜炎小鼠模型,用CpGODN或对照ODN(GpC ODN)对其进行干预,PBS干预作为阴性对照.实验分为预防实验(模型动物在变态反应原再次激发前给药)和治疗实验(激发后给药),对小鼠眼部临床症状进行评分.取小鼠结膜组织进行组织病理学检查,并计数标本中的炎性细胞.应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)法动态观察小鼠结膜组织中TLR4 mRNA的变化;将烟曲霉菌免疫原与眼部回流淋巴结和脾脏的细胞进行共培养,流式细胞分析培养细胞中调节性T淋巴细胞的比例和活化状态.结果预防实验中,结膜下注射CpG ODN组与GpC ODN对照组、PBS对照组比较,小鼠眼部过敏症状评分差异均无统计学意义(P＞0.05);CpG ODN组与GpCODN对照组、PBS对照组比较结膜组织中性粒细胞数降低,差异均有统计学意义(21.25±11.59 vs 30.75 ±11.44,21.25±11.59 vs 69.00±9.90;t=5.140,t=3.210,P＜0.01);TLR4 mRNA表达上调.在治疗实验中,CpG ODN组与GpC ODN对照组、模型对照组比较,眼部过敏症状评分降低(t=4.000,t=2.750,P＜0.05);中性粒细胞数显著减少(t=4.870,t=3.829,P＜0.01).CpG ODN治疗组小鼠眼部回流淋巴结CD4+ CD25+细胞以及CD4+ CD25+ CD69+ 细胞所占的比例均显著高于GpC ODN组和PBS对照组(P＜0.05).结论 CpG ODN通过上调结膜TLR4的表达、活化Treg细胞来预防和治疗烟曲霉菌引起的变态反应性结膜炎,预先结膜下注射和点眼均可减轻小鼠眼部过敏症状和晚期结膜炎性细胞的聚集.

关键词：烟曲霉菌、变态反应性结膜炎、CpG、ODN、调节性T淋巴细胞

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分类号：R777.31(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金30772375;973计划前期研究专项2009CB526506

在线出版日期：2011-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：308-313