DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用不同浓度H2O2处理SRA01/04细胞,构建氧化损伤模型.取氧化损伤的SRA01/04细胞分为H2 O2组、H2 O2+空白质粒转染组和H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组进行转染处理.采用实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测转染后氧化损伤的SRA01/04细胞中ERCC6 mRNA和科凯恩综合征互补B蛋白(CSB)的表达变化.采用免疫印迹实验和EdU染色实验分别检测转染后各组SRA01/04细胞凋亡相关蛋白表达变化和细胞增殖能力.结果 当H2O2处理浓度为200μmol·L-1时,SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和CSB蛋白的相对表达量最低,后续转染实验H2 O2处理浓度均采用200μmol·L-1.与H2 O2组和H2 O2+空白质粒转染组相比,H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和蛋白表达水平均显著增高(均为P<0.05).进一步实验发现,与另外两组相比,H2O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞中的促凋亡蛋白Bax表达均明显降低,而抑制凋亡的蛋白Bcl-2表达则均明显增加(均为P<0.05).EdU染色实验检测结果显示,与H2O2+空白质粒转染组相比,H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞内绿色荧光亮度增高,阳性细胞数量增加,表明SRA01/04细胞的增殖能力增强.结论 ERCC6基因可能通过减弱DNA的核苷酸切除修复作用抑制氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖、促进其凋亡从而导致老年性白内障的发生.
老年性白内障;氧化损伤;ERCC6;晶状体上皮细胞
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R776(眼科学)
2022-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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