杞精明目汤颗粒剂对肿瘤坏死因子-α刺激下结膜松弛症成纤维细胞MAPK信号通路的影响
目的 观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,杞精明目汤颗粒剂对结膜松弛症(conjunctivochalasis,CCH)结膜成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的影响,探讨CCH的发病机制及有效治疗策略.方法 体外培养CCH结膜成纤维细胞,分为CCH组、CCH+ TNF-α组及CCH+ TNF-α+杞精明目汤组.CCK-8确定杞精明目汤颗粒剂有效浓度,用含10-2 mg·L-1的TNF-α刺激培养的成纤维细胞,加入杞精明目汤颗粒剂干预48 h,分别采用ELISA、Western Blot和RT-PCR检测MAPK信号通路相关蛋白及mRNA的表达,并行统计学分析.结果 CCK-8确定杞精明目汤颗粒剂有效浓度为1.61 g·L-1.三组MAPK信号通路相关分子细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)、c-jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)、p38 MAPK及其磷酸化水平的吸光度(A450)值总体差异均有统计学意义(均为P＜0.05),且TNF-α可明显上调CCH表达ERK1/2、JNK1/2、p-JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK(均为P＜0.05),而杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞表达ERK1/2、p-ERK1/2、JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK(均为P＜0.05).三组p-ERK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白总体差异均有统计学意义(均为P＜0.05),且TNF-α可明显上调CCH成纤维细胞p-ERK1/2、p-JNK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白的表达(均为P＜0.05),杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞表达p-ERK1/2、p38 MAPK(均为P＜0.05).三组ERK1/2、p38 MAPK mRNA表达总体差异均有统计学意义(均为P ＜0.05),且TNF-α可明显上调CCH成纤维细胞ERK1/2、p38 MAPK mRNA的表达(均为P＜0.05),杞精明目汤可显著下调TNF-α刺激后的CCH成纤维细胞p38 MAPK mRNA表达(P＜0.05).结论 TNF-α可上调CCH成纤维细胞MAPK信号通路的表达,导致CCH的发生发展,而杞精明目汤颗粒剂在一定程度上可下调MAPK信号通路的表达从而发挥治疗作用.
结膜松弛症、成纤维细胞、肿瘤坏死因子α、丝裂原活化蛋白激酶、杞精明目汤颗粒剂
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R777.3(眼科学)
上海中医药大学预算内项目2015YSN50;上海市医学重点专科项目ZK2015A20;上海市普陀区中心医院英才计划项目编号:2017202BShanghai University of Traditional Chinese Medicine Budget Project2015YSN50;Shanghai Key Medical Specialist-Department of OphthalmologyZK2015A20;Elite Plan of Shanghai Central Hospital of Putuo District2017202B
2018-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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