增生细胞核抗原核酶对兔视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用
目的 探讨增生细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)核酶(ri-bozyme,Rz)对PCNA表达及细胞增生的影响,为进一步基因治疗增生性玻璃体视网膜病变提供实验基础.方法 设计构建针对PCNA的锤头状核酶(PCNa-Rz),通过阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导转染体外培养的视网膜色素上皮细胞(经此处理的为Rz载体组),观察其在细胞中的分布,应用3H-TDR掺入实验及四甲基偶氮唑盐比色实验检测细胞增生及活性,应用免疫组织化学技术检测细胞内PCNA表达水平,并设立裸Rz组、空载体组和对照组进行对照研究.结果 在脂质体介导下PCNα-Rz可成功转染培养的视网膜色素上皮细胞,较裸PCNα-Rz转染效率明显增高;Rz载体组细胞增生活性显著低于裸Rz组、空载体组及对照组,细胞生长抑制率显著提高(81.2%);Rz载体组细胞PCNA表达水平(9.2±1.3)%显著低于裸Rz组(27.5±4.3)%、空载体组(37.4±5.2)%和对照组(4.6±5.8)%,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01).结论 PCNα-Rz能显著抑制培养的兔视网膜色素上皮细胞中PCNA的表达,降低细胞的增生活性,此项技术有望应用于人眼并可能成为防治增生性玻璃体视网膜病变的有效手段.
增生细胞核抗原、核酶、视网膜色素上皮细胞、增生性玻璃体视网膜病变
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R774;Q959.836(眼科学)
河南省医学科技创新人才工程基金0359
2016-12-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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