视网膜母细胞瘤中MGMT启动子区甲基化状态及其产物表达
目的 检测视网膜母细胞瘤(RB)中,06-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化状态及mRNA、蛋白产物的表达情况,并探讨其与RB临床、组织病理学特征的可能关系.设计 实验研究.研究对象 石蜡包埋RB组织20例,RB细胞系4株(Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR 、WERI-RB1).方法 采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测20例石蜡包埋RB组织及4株RB细胞系MGMT启动子区甲基化状态,并进一步以实时荧光定量PCR及蛋白印迹确认MGMT mRNA、蛋白的表达.收集患者临床资料(如性别、发病年龄等),并对RB组织标本HE、免疫组织化学染色切片进行组织病理学诊断,判断组织病理学特征(如肿瘤侵犯范围、虹膜新生血管等).主要指标 MGMT启动子区甲基化状态,MGMT mRNA及蛋白表达水平,患者临床及组织病理学特征.结果 20例石蜡包埋RB组织标本中,12例(60％ )MGMT启动子区为部分/完全甲基化,余8例(40％)未甲基化,甲基化与未甲基化组的临床及组织病理学指标不具有统计学差异(P＞0.05).Y79、SO-RbS0、SO-Rb50/VCR 3株RB细胞系MGMT启动子区为部分甲基化；WERI-RB1细胞系MGMT启动子区为未甲基化.4株RB细胞系均有不同程度MGMT mRNA及蛋白的表达,WERI-RB1 MGMT mRNA表达水平(1.000±0.040)高于其他3株细胞系(Y79,0.617±-0.026；SO-Rb50,0.356±-0.020;SO-Rb50/VCR,0.389±0.017),差异具有统计学意义(P＜0.05),WERI-RB1 MGMT蛋白表达水平(1.506±0.493)略高于其他3株细胞系(Y79,1.388±0.304;SO-Rb50,1.495±0.212; SO-Rb50/VCR,1.406±0.547),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在RB组织及细胞系中,存在较高的MGMT启动子区甲基化率,MGMT甲基化状态可影响其产物表达水平.
O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶、甲基化、表达、视网膜母细胞瘤
21
R73;R57
国家自然科学基金项目81172393
2012-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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121-126
