HBV前S1编码链锁核酸的设计及体外抗HBV效果观察

摘要：

目的 针对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前S1 dsDNA同聚嘌呤区设计反基因寡核苷酸药物-锁核酸(locked nucleic acid,LNA),并在体外观察抑制HBV复制的效果.方法 针对HBV前S1 dsDNA的3023～3037 nt、3094～3109 nt两个同聚嘌呤区,利用RNA structure软件分别设计并合成LNA,以阳离子脂质体为载体,将药物转染入HepG2.2.15细胞内,采用荧光定量PCR技术和化学发光免疫技术分别检测3 d、6 d和9 d细胞培养上清液中HBV DNA和HBsAg的含量;CCK8法检测锁核酸对HepG2.2.15细胞代谢的影响.结果 LNA对HepG2.2.15细胞的HBV DNA转录和HBsAg表达有显著的抑制作用,并且抑制效果随着时间进一步加强,在第9天的抑制率分别为45.37％和52.09％.两个同聚嘌呤组与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),而封闭3023～3037nt同聚嘌呤区的LNA抑制作用较强,且最适序列长度为15～25 bp.CCK8实验显示LNA对HepG2.2.15细胞无任何明显的代谢影响.结论 针对前S1 dsDNA同聚嘌呤区的反基因锁核酸分子在体外能够有效地抑制HBV的复制,以封闭3023～3037 nt靶位效果较强,且合适序列长度为15～25 bp.

关键词：反基因寡核苷酸药物、乙型肝炎病毒、锁核酸、反基因治疗

所属期刊栏目：48

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;广西科技计划项目基地与人才专项;广西自然科学基金;广西肝胆疾病临床医学研究中心

在线出版日期：2020-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：91-95