HBV C编码链抗HBV潜在药物靶标的设计、筛选及鉴定

摘要：

目的 针对HBV C编码链设计合成反基因锁核酸(locked nucleic acid,LNA)片段,以HepG2.2.15细胞为研究对象,筛选并鉴定出能特异性阻断HBV复制和表达的有效治疗靶点药物.方法 利用RNAstructure5.0软件针对HBV C区编码链1914～1928 nt、1969～1983 nt、2002～2016 nt、2053～2067 nt、2069～2073 nt、2162～2176 nt和2404～2418 nt位点设计合成7条反基因LNA片段(分别以SQ1～SQ7表示),以阳离子脂质体lipofectamine 3000(lipo3000)介导转染HepG2.2.15细胞,隔3天对应给药,连续给药3次,分别于给药后第3、6、9天收集培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBeAg水平;实时荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)测定HBV-DNA浓度.结果 针对HBV C区编码链2162～2176 nt(SQ6)和2404～2418 nt(SQ7)位点的反基因LNA片段对HBV-DNA复制和HBeAg表达的抑制效果最明显,用药后第3、6、9天,SQ6对HBeAg的平均抑制率分别为43.91％、59.95％和59.07％,HBV-DNA则分别为42.91％、50.09％和51.14％;SQ7对HBeAg的平均抑制率分别为44.18％、60.81％和60.02％,HBV-DNA则分别为47.28％、54.16％和52.22％.结论 针对HBV C区编码链2162～2176 nt和2404～2418 nt位点的反基因LNA片段体外能有效抑制HBV的复制和表达,为抗HBV治疗提供一定的理论依据和实验依据.

关键词：乙型肝炎、乙型肝炎病毒、锁核酸、基因治疗

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分类号：R512.6+2(传染病)

资助基金：国家自然科学基金81460123;广西自然科学基金2018GXNSFAA281187;广西肝胆疾病临床医学研究中心桂科AD17129025-04;广西卫生和计划生育委员会自筹经费科研课题Z20180219;百色市科学研究与技术开发计划项目百科计20182513;博导培育计划人选项目右医附院院字〔2018〕32号;博点学科建设项目右医附院院字〔2018〕29号

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：12-16