NOC2L基因重组慢病毒表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

摘要：

目的 构建NOC2L基因重组慢病毒并使其在293T细胞中表达.方法 通过设计引物及PCR扩增获得NOC2L全基因片段,将pCDH-GFP载体分别用XbaⅠ和BamHⅠ双酶切制备线性化载体;NOC2L全基因片段和线性化载体经切胶回收后,通过同源重组反应将NOC2L全基因片段连接到线性化的pCDH-GFP载体上,构建pCDH-NOC2L-GFP慢病毒表达载体;通过菌落PCR、质粒双酶切、测序等方法对构建的NOC2L基因重组慢病毒表达载体进行鉴定,利用构建的pCDH-NOC2L-GFP包装NOC2L慢病毒并使用该慢病毒感染293T细胞.结果 菌落PCR、质粒双酶切和测序结果显示成功将NOC2L基因连接到pCDH-GFP载体上,使用构建成功的pCDH-NOC2L-GFP转染293T细胞,能够成功转染及包装NOC2L基因重组慢病毒,同时包装好的NOC2L基因重组慢病毒能够成功感染293T细胞并过表达293T细胞中的NOC2L基因.结论 采用本研究方法能成功构建NOC2L基因重组慢病毒表达载体.

关键词：NOC2L、NIR、慢病毒表达载体

所属期刊栏目：47

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广西医药卫生自筹经费计划课题 Z20180222

在线出版日期：2020-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：892-896