运用蛋白质组学技术研究与氨甲蝶呤耐药性相关的蛋白质

摘要：

氨甲蝶呤(MTX)是一种重要的常用化疗药物,然而由于肿瘤细胞对其耐药性的增强而经常导致其疗效大大降低.为了寻找并鉴定与MTX耐药性相关的蛋白质从而为进一步阐明MTX的耐药机制提供线索,培养来源于小鼠NIH3T3的小鼠胚胎成纤维细胞系3T3R500与其耐300μmol/L MTX的细胞系MTX300,提取上述两种细胞系的总蛋白质,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,扫描并通过软件分析考马斯亮蓝染色的2-DE凝胶,选取表达差异最显著的点,胶内酶切后MALDI-TOF-MS进行肽指纹图谱(PMF)鉴定.图像分析显示,实验组和对照组的蛋白质组图谱之间,一些蛋白质点的表达有明显的变化.通过MALDI-TOF-MS和数据库查询,成功鉴定了耐药后表达变化最显著的蛋白质点为二氢叶酸还原酶(DHFR),并通过Western blot验证了该结果,提示DHFR在MTX耐药机制中发挥重要作用.

关键词：蛋白质组、氨甲蝶呤、耐药性、双向凝胶电泳、MALDI-TOF-MS、PMF

所属期刊栏目：33

分类号：R3(基础医学)

资助基金：中国科学院资助项目30370783;the Key Project of Science and Technology by Heilongjiang ProvinceGB03C601-1

在线出版日期：2006-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：391-396