HCMV UL97 mRNA序列特异性M1GS的构建及其体外切割活性研究

摘要：

HCMV UL97基因编码一种蛋白激酶,该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成,且序列异常保守,可作为抗HCMV治疗的重要靶位.基于HCMV UL97 mRNA T3位点附近的序列,设计一段与该位点互补的引导序列(Guide Sequence,GS),并将其与大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3′末端共价连接,构建了一种序列特异性的M1GS(M1-T3).体外实验证实,所构建的M1-T3可与UL97 mRNA的T3位点特异性结合并产生有效的切割作用.进一步研究M1-T3的结构与其对底物片段靶向切割活性的关系,结果发现在M1 RNA与GS之间增加一段88核苷酸桥连序列的M1-T3(即M1-T3*),其靶向切割活性大大增强.此外,去除M1-T3 3′末端的CCA序列,其靶向切割活性将基本丧失.上述结果表明,这段桥连序列和3′末端的CCA序列是M1-T3 重要的结构元件.这不仅有助于阐明M1GS与其底物的相互作用机制,同时也为进一步评价M1-T3在体内对UL97基因表达及病毒复制的抑制活性奠定了基础.

关键词：核酶P(Rnase P)、M1GS、人巨细胞病毒、UL97

所属期刊栏目：32

分类号：Q933(微生物学)

资助基金：中国科学院资助项目30370776;广东省博士启动基金36703;021162;000718

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1205-1212