Gap-Repair方式建立一种基于pBR322-Red的新型重组工程系统

摘要：

应用Gap-Repair新技术,以pBR322为载体,在λ噬菌体Red重组酶的作用下,通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7 kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵子基因序列.建立了一种能够随意在不同细菌宿主中转移的基于pBR322-Red的重组工程系统.为了验证pBR322-Red的生物功能,以大肠杆菌染色体上的galk基因为靶标,用Red介导的单链DNA重组技术敲入T→G单碱基突变,使galk基因内编码第145位氨基酸的密码子由TAT转变成TAG,产生了一个琥珀突变.确定了pBR322-Red系统的重组功能.

关键词：Gap-Repair、Red重组酶、重组工程

所属期刊栏目：32

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：军队科研项目01MA089

在线出版日期：2005-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：533-537