点突变Pro229Ser和Glu243Gly对耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶性质的影响
用PCR随机诱变方法,研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚2,3-双加养酶性质的影响。比较分析了突变体ro229Ser和Glu243Gly与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Pro229→Ser或Glu243→Gly并未改变酶的最适反应温度(均为60℃);突变体Pro229Ser(Kcat/Km=4.89±0.01×106mol-1s-1)以及突变体Glu243Gly(Kcat/Km=5.88±0.01×106mol-1s-1)的催化能力与野生型酶(Kcat/Km=6.97±0.01×106mol-1s-1)相比有所下降;点突变Pro229→Ser大幅度降低了酶的热稳定性(ΤTm≈10.2℃),而点突变Glu243→Gly对酶的热稳定性影响较小(Tm≈1.5℃)。推测Pro229对耐热邻苯二酚2,3双加养酶的热稳定性有重要贡献。
随机诱变、热稳定性、耐热邻苯二酚2、3-双加养酶
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Q319(遗传与变异)
国家自然科学基金39870402
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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278-284