小鼠生长激素受体基因环状转录本的克隆及其表达规律
根据文献报道并通过circBase数据库查找,发现小鼠生长激素受体基因(growth hormone receptor,GHR)存在8个环状转录本.为确定GHR基因环状转录本(circGHR)的真实存在,探究其表达规律,本研究以昆明小鼠(Mus musculus)为研究对象,通过PCR扩增和测序检测circGHR的真实存在,并筛选出一个circGHR作为目标分子,通过RNase R处理和反转录证实了circGHR的环形结构,利用qRT-PCR分析circGHR和GHR mRNA的时空表达规律.结果表明:小鼠circGHR全长为820 nt,由GHR基因外显子2~8环化形成.RNase R耐受性分析表明,小鼠circGHR具备环形分子的一般特征,不易被RNase R降解.与oligo-d(T)18引物相比,随机引物对circGHR具有较高的反转录效率,进一步说明circGHR是一个不含poly(A)的环状结构分子.组织表达谱结果表明,circGHR在1周龄和7周龄小鼠肝脏和肾脏高表达,在胸肌和腿肌中低表达;circGHR在肝脏和胸肌组织的时序表达谱结果表明circGHR表达无显著差异;circGHR在腿肌组织的时序表达谱结果表明,circGHR在小鼠5周龄之前为低表达,在7周龄以后表现为高表达.本研究结果证实了小鼠GHR基因存在一个环状转录本circGHR,并初步揭示了circGHR的表达规律,为后期深入开展小鼠circGHR的生物学功能及其在小鼠生长发育过程中的作用机制奠定基础.
小鼠;生长激素受体;环状RNA
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国家自然科学基金项目;广东省自然科学基金项目;粤桂联合基金
2021-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共11页
890-900