一种载样简单的多重可视化PCR微芯片

摘要：

在核酸检测领域急需一种能够经济、快速、操作简便且同时检测多个靶标的新技术.常规多重PCR能够同时扩增多个靶标,但由于在一个试管中引物间的相互作用和竞争,重数往往受到限制.本研究设计了一种操作简单的多重PCR芯片,可以同时进行54个靶标的扩增.芯片结构简单,一条微通道将正下方平行排列的多个微孔连接在一起,微通道只留加样口和出样口.同时整个微通道呈疏水状态,微孔呈亲水状态.将不同的引物对和低溶点琼脂糖提前固定于不同的微孔中,通过一次加入PCR mix,并加入矿物油推动PCR mix进入到每个微腔室中,同时微孔也被矿物油相互隔离避免交叉反应.加样后将芯片放置于平板PCR仪上进行扩增,在整个反应过程中低溶点琼脂糖呈液态,反应结束后凝固成固体,便可引入核酸染料进行染色,最后利用自制小型的紫外照射仪上进行可视化检测和拍照记录.利用此平台成功实现了对7种非常重要和常用的转基因作物靶标的并行检测,结果显示此平台具有较高的灵活性和特异性.此技术经过进一步优化可应用于包括转基因检测在内的多重核酸检测领域.

关键词：多重PCR、微芯片、亲疏水、低溶点琼脂糖、转基因作物检测

所属期刊栏目：39

分类号：O6 ;TV6

资助基金："十三五"国家重点研发计划2016YFA0500601;国家自然科学基金编号:31670831, 31370813资助[Supported by the National Key Research and Development Project of China2016YFA0500601;National Natural Science Foundation of ChinaNos.31670831, 31370813]

在线出版日期：2017-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：525-534