脊椎动物Cyclophilin A肽基脯氨酰顺反异构酶活性及遗传变异分析

摘要：

CyclophilinA(简称CypA)由PPIA(Peptidylprolyl isomerase A)基因编码,是典型的Cyclophilin家族蛋白,具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性,在蛋白质的折叠和转运、信号转导、炎症、免疫调节、细胞凋亡及病毒复制等生物学过程中发挥着重要作用.本研究重点探讨了不同脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性及其遗传变异.根据GenBank 数据库PPIA基因的序列信息,克隆了脊椎动物的PPIA基因并构建其原核表达载体,其中鼠耳蝠(Myotis davidi)和绿头鸭(Anas platyrhynchos)的PPIA基因序列为首次报道.利用大肠杆菌表达GST-CypA融合蛋白并进行亲和层析,切除GST标签后再进行分子筛层析,获得纯化的CypA蛋白.利用胰糜蛋白酶偶联法测定CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性,发现12种脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性无显著差异.同时,通过一系列遗传变异和分子进化分析,发现12种脊椎动物CypA的酶活位点、CsA结合位点等重要功能域的氨基酸序列完全一致,而且其结构和在染色体中的基因定位也非常保守.研究结果表明,脊椎动物CypA的关键功能域高度保守,这是CypA维持其酶活及生物学功能的有力保障.

关键词：脊椎动物、Cyclophilin A、肽基脯氨酰顺反异构酶、分子进化

所属期刊栏目：38

分类号：R32;R-3

资助基金：国家自然科学基金项目31472178,81271849;国家科技支撑计划项目编号:2015BAD11B02资助[Supported by the National Natural Science Foundation of China.31472178,81271849;the National Key Technology Support Program No.2015BAD11B02]

在线出版日期：2016-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：736-745