绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析

摘要：

猪是人类异种器官移植的理想供体，然而猪-人的异种器官移植会产生剧烈的排斥反应。虽然已制备的α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除（Galactosyltransferase gene knockout, GTKO）猪可有效缓解猪-人异种器官移植引起的超急性免疫排斥，但缺少报告基因直观示踪移植后的细胞迁移及器官排斥状态。本文将 CAG启动子驱动增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein, EGFP）的表达载体导入GTKO猪耳成纤维细胞，通过体细胞核移植技术制备了 EGFP 猪。利用双荧光蛋白观测镜、荧光显微镜及定量 PCR 扩增观察、检测和分析克隆猪各组织器官中EGFP蛋白和转录本的表达状况。结果显示，EGFP蛋白及转录本在克隆猪各组织器官中均有表达，但在肝脏和中枢神经系统中表达较弱。本文成功获得了各组织器官表达EGFP的GTKO猪，为EGFP示踪异种细胞组织移植奠定了基础。

关键词：GTKO、增强型绿色荧光蛋白、猪、异种移植

分类号：R3 ;S85

资助基金：亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室开放课题编号SKL201404;国家高技术研究发展计划863计划项目编号2012AA020601

在线出版日期：2016-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1211-1217