植物基因组编辑及衍生技术最新研究进展

摘要：

基因组编辑技术已经在多个模式植物、动物以及其他生物中得到成功应用。基因组编辑是利用序列特异核酸酶(Sequence-specific nucleases, SSNs)在基因组特定位点产生DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSBs)，从而激活细胞自身修复机制——非同源末端连接(Non-homologous end joining, NHEJ)或同源重组(Homologous recombination, HR)，实现基因敲除、染色体重组以及基因定点插入或替换等。锌指核酸酶(Zinc finger nuclease, ZFN)、TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)和CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated 9)系统是最主要的3类SSNs。ZFN和TALEN是利用蛋白与DNA结合方式靶向特定的基因组位点，而最新的 CIRISPR/Cas9系统则是利用更简单的核苷酸互补配对方式结合在基因组靶位点，其构建简单、效率更高效，因而促进了基因组编辑在植物中的广泛应用。利用基因组编辑技术除了实现植物基因定点突变外，还可以将 SSNs 的 DNA 结合域与其他功能蛋白融合，实现基因的靶向激活、抑制和表观调控等衍生技术。本文从基因组编辑技术的原理与优势、SSNs 组成及构建方法、基因组编辑及衍生技术在植物中应用、优化SSNs突变效率和减少脱靶突变方法等方面进行了系统介绍，并对未来需要迫切解决的一些问题进行了分析和展望。

关键词：基因组编辑、ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9、同源重组、脱靶突变

分类号：TP3;R5

资助基金：国家自然科学基金项目编号31420103912和31271795;转基因重大专项编号2014ZX0801003B

在线出版日期：2015-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共21页

页码：953-973