利用TALEN技术在牛胎儿成纤维细胞中敲除Myostatin基因

摘要：

肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因能够负向调节骨骼肌的生长和发育,牛MSTN基因突变会出现“双肌”特征.文章利用转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)靶向敲除牛胎儿成纤维细胞的MSTN基因,获得敲除MSTN基因的细胞系,为制备MSTN基因敲除牛提供材料.构建一对MSTN基因的TALENs真核表达载体,分别采用PEI转染试剂和电穿孔法进行牛胎儿成纤维细胞的转染,测序结果表明TALEN技术可用于敲除牛MSTN基因,利用T7核酸内切酶1(T7E1)检测其突变效率,结果显示电穿孔转染的敲除效率为20.4％.通过有限稀释法,共获得10个MSTN基因敲除的细胞克隆(包括MSTN-/-和MSTN+/-),其靶位点敲除的碱基数分别是1～20不等,部分会出现移码突变.出现移码突变的细胞系可用于MSTN基因敲除的转基因肉牛的制备.

关键词：TALENs、牛、Myostatin、敲除、转染

所属期刊栏目：36

分类号：S85;S82

资助基金：国家转基因专项2011ZX08007-002

在线出版日期：2014-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：685-690