单管PCR-Pyrosequencing快速检测华法林代谢酶基因多态性方法的建立
文章旨在建立一种单管、快速及高通量的华法林药物代谢酶相关基因多态性的检测方法.通过抽取人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以Sanger测序法测序结果为对照,观察分析的准确性.结果显示,华法林药物代谢酶的3个相关基因多态性(CYP2C9*2,CYP2C9*3、VKORCl(-1693)于单管中可被同时检测,一次可获得96份DNA的华法林药物代谢相关多态性位点检测结果.经与Sanger测序方法比较,符合率为100%.结果表明本方法可准确、高通量、快速检测华法林药物代谢酶相关基因多态性,与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比,能有效降低检测成本,节省检测时间.该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值,也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测.
CYP2C9、VKORC1、华法林、焦磷酸测序
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R56;Q75
2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1283-1290