中国红豆杉细胞色素P450还原酶的基因克隆、表达与活性分析

摘要：

细胞色素P450还原酶(Cytochrome P450 reductase,cPR)是细胞色素P450羟基化酶电子传递链的组成部分,在生物体内起着重要的电子传递作用.文章从中国红豆杉(Taxus wallichiana var.Chinensis)愈伤组织细胞中克隆CPR基因(TchCPR),TchVPR含有一个2154 bp碱基的阅读框,编码717个氨基酸残基;在氨基酸水平上它与裸子植物细胞色素P450还原酶的同源性(>82%)高于其他被子植物的细胞色素P450还原酶(<74%).在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达了全长和从N-端截短不同数目氨基酸残基的6个融合肽段,经亲和层析纯化,分析了表达的不同长度融合蛋白的电子传递效率.结果表明截短长度大于61个氨基酸残基肽段的胞色素P450还原酶都能够诱导表达,在表达水平上无显著差异,而截短61个氨基酸的CPR融合蛋白电子传递的催化活性(1.6057 nmol Cyt Cred/min/μg TchcPR融合蛋白)高于其他4个融合蛋白.

关键词：中国红豆杉、细胞色素P450还原酶、诱导表达

所属期刊栏目：32

分类号：R91;R97

资助基金：国家自然科学基金项目30772677;北京市自然科学基金项目5072038

在线出版日期：2011-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1187-1194