北京油鸡α1-AGP基因结构与表达特征研究

摘要：

提取北京油鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌等不同组织的总RNA,利用RT-PCR方法检测α1-酸性糖蛋白基因(α1-AGP)mRNA的差异表达.将α1-AGP基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-C1,构建带有G即报告基因的重组表达载体pEGFP-α1-AGP,将其导入北京油鸡体外培养细胞中,并进行G418药物筛选和克隆化培养.结果表明:α1-AGP基因开放阅读框长度为612 bp,编码203个氨基酸,在北京油鸡肝、肺、腿肌和胸肌中有表达;转染后24、48和72 h,pEGFP-α1-AGP转染率在31.3%～47.6%之间,绿色荧光主要集中在细胞核中,随着表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状,经药物筛选和克隆化培养,获得表达pEGFP-α1-AGP融合蛋白的阳性克隆细胞株,利用RT-PCR与Western blotting检测确认pEGFP-α1-AGP已整合到北京油鸡成纤维细胞的基因组中,在优化的条件下,阳性细胞凋亡率、形态、生长与增殖状况与对照组比较差异不显著(P>0.05).

关键词：北京油鸡、α1-酸性糖蛋白基因、荧光蛋白、成纤维细胞、亚细胞定位

所属期刊栏目：31

分类号：R73;S81

资助基金：国家高技术研究发展计划项目863计划项目2006AA10Z198,2007AA10Z170

在线出版日期：2009-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：620-628