半滑舌鳎雌性特异AFLP标记CseF783的克隆及其在遗传性别鉴定中的应用
半滑舌鳎性别控制和全雌育种等研究领域中迫切需要一种能够快速鉴定鱼类个体遗传性别的有效方法.文章采用AFLP技术,利用选择性引物组合(E-ACT/M-CAA)从半滑舌鳎中筛选到一条雌性特异的AFLP标记.对该标记进行二次PCR扩增、琼脂糖凝胶回收、克隆、测序.分析表明,序列全长为791 bp,与GenBank中的序列无同源性.以该雌性特异AFLP标记DNA序列为模板.设计了一对特异的PCR引物,成功地将其转化为SCAR(Sequence characterized amplified regions)标记,并在100尾已知性别的半滑舌鳎个体(雌雄各50尾)中进行验证,结果表明,该SCAR标记在所有雌性个体中均扩增得到一条长度为324 bp的DNA条带,而在49尾雄性个体中均扩增不到该DNA条带(有1尾雄性个体例外),证明该SCAR标记是雌性特异的,并可用于半滑舌鳎个体遗传性别鉴定.随后,利用该SCAR标记检测了3日龄半滑舌鳎幼苗,结果表明,雌性个体比例为41.7%.
半滑舌鳎、雌性特异AFLP标记、SCAR标记、遗传性别、鉴定
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S96;X50
国家高技术研究发展计划项目863计划2006AA10A403;山东省良种工程重大项目及山东省泰山学者建设工程项目资助
2009-03-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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