10.3321/j.issn:0253-9772.2006.05.010
谷胱甘肽S-转移酶Zeta类基因在酿酒酵母中的表达
谷胱甘肽S-转移酶Zeta类(GSTZ)是一种重要的多功能酶,与细胞生化代谢、环境净化等密切相关.将拟南芥、甘蓝型油菜品系陕2B与垦C1的GSTZ基因克隆到大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体pYES2的多克隆位点,筛选到重组子后,提取重组质粒并将其转入酿酒酵母营养缺陷型菌株INVSc1细胞中,经SC-U培养基选择得到重组酵母Y2At、Y2BnB和Y2BnC.重组酵母在含棉子糖和半乳糖的诱导培养基中,表达出了具有二氯乙酸脱氯活力的谷胱甘肽S-转移酶Zeta类,且主要以可溶状态存在于酵母细胞中.不同碳源比较发现,使用半乳糖为唯一碳源时,与棉子糖和半乳糖共同使用相比,酵母生长虽受到轻微影响,但表达的GSTZ比活力几乎不受任何影响.0~96 h诱导时间的优化实验表明,36 h诱导下呈现最高比活力.同时也对不同GSTZ的Km值进行了比较.
谷胱甘肽S-转移酶Zeta类、酿酒酵母、二氯乙酸脱氯(DCA-DC)活力
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Q78(基因工程(遗传工程))
教育部留学回国人员科研启动基金2003-406;南开大学校科研和教改项目ZB0001
2006-06-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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