应用双色荧光原位杂交技术检测克氏综合征

摘要：

探讨用双色荧光原位杂交技术(dual-color fluorescence in situ hybridization,D-FISH)检测性染色体数目异常克氏综合征的应用价值,建立常规分裂期染色体和间期细胞FISH技术的实验方法.以Biotin标记的X染色体α-卫星DNA(pBamX7)探针和以Digoxigenin标记的Y染色体长臂末端重复序列(pY3.4)探针对19例克氏综合征标本同时进行外周血染色体及其间期细胞核的原位杂交,分别用Avidin-FITC和Rhodamine-FITC及其Anti-avi-din进行信号的检测与放大,DAPI复染.于Olympus AX-70型荧光显微镜下,分别通过WIB、WIG及其WU滤光镜观察杂交信号及其染色体或间期核背景,并统计外周血中期染色体及其间期细胞核的杂交信号颗粒数量.在显微镜下可见以Biotin标记的pBamX7探针显示2个绿色杂交信号,以Digoxigenin标记的pY3.4探针显示1个红色杂交信号,染色体或间期核背景经DAPI复染显示蓝色;18例出现XXY杂交信号的细胞,染色体及其间期细胞核杂交平均出现率分别为95.89%和95%,明显大于正常对照标准值2.75%,证实核型为47,XXY,与染色体检测的结果一致;其余1例染色体核型检测为嵌合体,XXY杂交信号细胞出现率为92%,同时检出6.7%的XY杂交信号细胞(＞正常对照标准值4.17%).用FISH技术检测性染色体数目异常克氏综合征具有快速、敏感度高、信号强、背景低、多色等优点,故FISH技术在产前诊断检测领域中显示其重要的应用价值和发展前景.

关键词：荧光原位杂交、克氏综合征、性染色体异常、DNA特异性探针

所属期刊栏目：25

分类号：Q75;R698+.2(分子遗传学)

资助基金：浙江省温州市科技计划S2002A021

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：271-275