正常人体淋巴细胞cDNA文库的构建

摘要：

应用GIBCOBRL建库试剂盒建立了正常人体淋巴细胞cDNA文库.取新鲜的正常人外周血,分离出淋巴细胞,进行体外培养,提取总RNA,纯化mRNA,并将其反转录成cDNA,与SalI和NotI接头连接后插入λZipLox载体,体外包装后转染到Y1090宿主菌中,进行滴度测试及文库扩增.构建的正常人淋巴细胞cDNA文库含2.6×106重组子,克隆效率为5×1012重组子/g cDNA,插入片段长度约为1～5kb.扩增后的文库浓度为3×107重组子/μl,将文库稀释到10-6时所产生的噬菌斑密度最为适宜.试验结果表明,该库符合标准,所构建的正常人淋巴细胞cDNA文库为进一步筛选目的基因、制作基因芯片等提供了有效的工具.

关键词：cDNA文库、构建、外周血、淋巴细胞

所属期刊栏目：24

分类号：Q75(分子遗传学)

资助基金：新疆重点学科建设项目1999Y11

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：143-145