基因体外随机突变的两种方法的研究

摘要：

引导蛋白质功能进化常用的方法是模拟和加速蛋白质基因自然重组的进程,即在蛋白质的基因中引进随机突变.因此,蛋白质基因体外随机突变的方法影响着引导蛋白质功能进化的效果.本文描述两种简单而有效的基因体外随机突变发生方法.一种是化学诱变法:将蛋白质基因用1.0mol/L硝酸钠在室温下处理1h,然后将突变基因插入质粒,导入大肠杆菌中表达;另一种方法是延伸诱变法:将10个随机氨基酸短肽基因连接到蛋白质基因上,使蛋白质C末端连接随机短肽,通过增大蛋白质分子来达到延伸蛋白质序列空间的目的.来自嗜热脂肪芽孢杆菌的过氧化氢酶I基因用这两种方法进行了随机突变,获得了大量突变体酶基因.通过对突变体酶基因表达产物性质变化的测定,证明这两种基因诱变方法能够有效地诱发基因的随机突变.

关键词：定向进化、化学突变、延伸突变、过氧化氢酶I、嗜热脂肪芽孢杆菌

所属期刊栏目：22

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省博士启动基金

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：96-100