人细胞骨架调节蛋白基因Nelin N端片段的原核表达

摘要：

[目的]构建Nelin基因N端片段的原核表达载体并表达此蛋白.[方法]设计带有BamH I/EcoR I酶切位点的引物,以已构建好的质粒pGEX-5X-Nelin为模板,用PCR扩增Nelin基因N端片段,并用BamH I/EcoR I酶切PCR产物和原核表达载体pGEX-5X-1,然后用T4 DNA连接酶将其连接,得到重组表达质粒pGEX-5X-Nelin-1,经双酶切鉴定和测序验证.重组表达质粒转化大肠杆菌BL 21,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,以SDS-PAGE进行分析.[结果]成功构建并表达了分子量约为43 KD的Nelin N端片段的融合蛋白.[结论]所表达的蛋白为蛋白纯化、抗体制备及研究其功能奠定了基础.

关键词：基因表达、融合蛋白类、原核表达

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分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30070313,30270557;北京市科技攻关项目H020220020310

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：235-238