10.13478/j.cnki.jasyu.2018.02.007
利用PicoGreen作为检测探针建立基于核酸适配体识别的玉米赤霉烯酮快速检测方法
玉米赤霉烯酮(ZEN)是一种能对动物和人类产生毒性的真菌毒素.研发灵敏而准确的玉米赤霉烯酮快速检测技术对于保障食品动物安全至关重要.该研究以PicoGree荧光染料为检测探针,利用其仅与dsDNA结合后才发出荧光的特性(激发波长:480 nm,发射波长:520 nm),当ZEN不存在时,适配体能够与其互补链结合而形成dsDNA,导致荧光强度增强;当ZEN存在时,适配体与ZEN结合而不能形成dsDNA,导致荧光强度减弱.建立了一种基于核酸适配体识别的ZEN快速检测方法.灵敏度试验表明:该方法的最低检测限为0.1μg/L(0.1 ppb),线性范围为0.1~1μg/L(0.1~1 ppb).检测时间可以控制在40 min内.特异性试验结果表明:ZEN核酸适配体与桔青毒素(CTN)、赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B1(AFB1)和伏马毒素B1(FB1)等真菌毒素不会出现交叉反应.本研究与传统的基于抗体识别的ELISA快检方法进行比较,Kappa值为0.805,表明二者一致性相当.由于核酸适配体价廉,检测时间短,因此本文开发的ZEN检测方法较常用的ELISA方法更具有推广和应用价值.
玉米赤霉烯酮、适配体、PicoGreen、快速检测
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TS210.7(食品工业)
浙江省"钱江人才计划"D类项目QJD1602023
2018-08-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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