食源性致病菌生物芯片-RCA检测新方法

摘要：

将生物芯片技术和滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)技术结合,建立一种在片RCA检测食源致病性菌新方法.依据待检测致病菌的基因组序列设计捕获探针(capture probe,CP)、检测探针(detect probe,DP)和滚环探针(rolling circle probe,RCP),其中捕获探针、检测探针与待检测致病菌基因组序互补,RCP不含任何待检菌基因组DNA序列,CP的5′末端修饰氨基,将其点样制备成CP微阵列,DP、RCP与待检菌gDNA混合后变性,将其与CP微阵列杂交并连接,RCA扩增反应体系中加入链亲和素进行在片扩增反应,分析检测结果.研究表明,该方法能灵敏、特异性地检测单一和混合靶标分子,以金黄色葡萄球菌为检测对象,其最低检测限可到达50 fg/μL,其线性范围是400～50 fg/μL,R2达到0.97,证实了该方法的可行性和可靠性,为食源性致病菌检测提供了新的技术方法.

关键词：生物芯片、滚环扩增、致病菌、检测探针

所属期刊栏目：34

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省重点研发计划;江苏省高等学校自然科学研究重大项目

在线出版日期：2019-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：26-34