人PNPLA3基因启动子转录调控的初步分析

摘要：

目的 构建人PNPLA3基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因裁体,在LO2细胞中比较不同长度启动子片段的活性,为研究PNPLA3基因的转录调控机制提供初步依据.方法 对PNPLA3基因5’侧翼区约1400个碱基进行生物信息学分析,预测其转录调控区域；利用PCR及酶切方法,以人外周血中全基因组DNA为模版扩增不同长度的PNPLA3基因上游启动子区序列,分别构建荧光素酶基因报告载体.瞬时转染LO2细胞,利用双荧光素酶报告基因分析系统检测各启动子的转录活性.利用在线分析软件预测PNPLA3基因主要转录调控区的潜在转录因子结合位点.结果 成功构建5段不同长度的PNPLA3基因上游启动子区的报告载体；在LO2细胞内启动子活性随片段长度变化,表现为当PNPLA3启动子片段从-1015截短到-647,从-647截短至-553,从-553截短至-333时活性变化不大,而从-333截短至-8时活性显著下降(P＜0.05)；Match分析显示-333～-8片段具有多个转录因子结合位点.结论 初步判断-333 ～8区是PNPLA3基因的主要转录调控区.

关键词：PNPLA3基因、启动子、转录调控、荧光素酶、LO2细胞

所属期刊栏目：44

分类号：R73;R39

资助基金：国家自然科学基金30900506;广东省自然科学基金S2011010005078;中山大学医科青年教师培育项目基金11ykpy36

在线出版日期：2013-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：410-414