肿瘤相关成纤维细胞外泌体对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制
目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)外泌体对肺腺癌细胞 A549 增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 取洛阳市中心医院胸外科收治的肺腺癌患者的癌组织和癌旁组织标本,并分离培养原代CAFs和正常成纤维细胞(NFs);收集CAFs和NFs细胞培养上清液,使用差速离心法提取CAFs外泌体和NFs外泌体.取对数生长期的A549 细胞,随机分为对照组、NFs外泌体组、CAFs外泌体组,NFs外泌体组、CAFs外泌体组细胞分别加入NFs外泌体、CAFs外泌体孵育,对照组细胞常规培养.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell 小室实验检测细胞侵袭能力,Western blot 法检测细胞中磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K)/蛋白激酶 B(Akt)通路相关蛋白 PTEN、PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇 3 激酶(p-PI3K)、Akt、磷酸化蛋白激酶 B(p-Akt)及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cad)、神经钙黏素(N-cad)、波形蛋白(VIM)表达.采用随机数字表法将 15 只裸鼠分为A549 裸鼠组、NFs外泌体裸鼠组、CAFs外泌体裸鼠组,每组5 只,将对照组、NFs外泌体组、CAFs外泌体组细胞分别移植到A549 裸鼠组、NFs外泌体裸鼠组、CAFs外泌体裸鼠组小鼠左侧腋下,移植6 周内每周测量小鼠肿瘤体积.结果 培养24h时,3 组细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(P＞0.05);培养48、72 h时,CAFs外泌体组细胞的增殖能力显著高于NFs外泌体组和对照组(P＜0.05);培养48、72 h时,对照组与NFs外泌体组细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(P＞0.05).培养24、48 h时,CAFs外泌体组细胞的迁移能力显著高于NFs外泌体组和对照组(P＜0.05);培养24、48 h时,NFs外泌体组与对照组细胞的迁移能力比较差异无统计学意义(P＞0.05).CAFs外泌体组侵袭细胞数显著多于NFs外泌体组和对照组(P＜0.05);NFs外泌体组与对照组的侵袭细胞数比较差异无统计学意义(P＞0.05).CAFs外泌体组细胞中N-cad、VIM蛋白相对表达量显著高于对照组和NFs外泌体组(P＜0.05),E-cad蛋白相对表达量显著低于对照组和NFs外泌体组(P＜0.05);NFs 外泌体组与对照组细胞中 N-cad、VIM、E-cad 蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).CAFs外泌体组细胞中PTEN 蛋白相对表达量显著低于对照组和NFs外泌体组(P＜0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值显著高于对照组和NFs外泌体组(P＜0.05);NFs外泌体组与对照组细胞中PTEN 蛋白相对表达量及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值比较差异无统计学意义(P＞0.05).移植第 1 周,3 组小鼠的肿瘤体积比较差异无统计学意义(P＞0.05);移植第2～6 周,CAFs外泌体裸鼠组小鼠的肿瘤体积显著大于A549 裸鼠组和NFs外泌体裸鼠组(P＜0.05);移植第2～6 周,NFs外泌体裸鼠组与A549 裸鼠组小鼠的肿瘤体积比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CAFs外泌体可促进肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,在小鼠体内促进肺腺癌的生长,其机制可能与EMT和PTEN/PI3K/Akt信号通路有关.
肿瘤相关成纤维细胞、外泌体、肺腺癌
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R734.2(肿瘤学)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目;洛阳市社会发展区域指导性科技项目
2023-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1016-1023
