含Sushi重复蛋白X连锁2基因敲除对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响
目的 探讨含Sushi重复蛋白X连锁2(SRPX2)基因敲除对肺腺癌人类肺泡基底上皮细胞A549 细胞生物学特性的影响.方法 根据是否敲除SRPX2基因将对数生长期的A549 细胞分为对照组和敲除组,敲除组细胞采用成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白9 基因编辑技术敲除SRPX2 基因,对照组细胞常规传代培养.采用聚合酶链式反应法、琼脂糖凝胶电泳以及DNA测序验证是否成功敲除SRPX2 基因.采用流式细胞术检测2组细胞周期,细胞计数试剂盒法检测2组细胞增殖情况,Transwell小室实验检测2组细胞迁移能力.结果 琼脂糖凝胶电泳及DNA测序结果均显示敲除组细胞成功敲除68 bp SRPX2基因部分序列.培养24 h时,敲除组G0/G1 及S期细胞所占比例显著低于对照组,G2/M期细胞所占比例显著高于对照组(P＜0.05);培养48 h时,敲除组S期细胞所占比例显著低于对照组,G2/M期细胞所占比例显著高于对照组(P＜0.05);培养48 h时,2组G0/G1 期细胞所占比例比较差异无统计学意义(P＞0.05).培养0、24、48、72、96 h时,对照组和敲除组细胞的增殖能力随时间的延长均呈升高趋势(F=244.463、87.198,P＜0.05);培养0、24、48、72、96 h 时,2 组细胞的增殖能力比较差异均无统计学意义(P＞0.05).培养24 h时,对照组和敲除组迁移细胞数分别为(24.200±3.899)、(6.800±1.304)个;培养48 h时,对照组和敲除组迁移细胞数分别为(92.200±6.419)、(48.800±2.280)个;培养24、48 h时,敲除组迁移细胞数显著少于对照组(t=9.464、14.247,P＜0.05).结论 敲除肺腺癌A549细胞中SRPX2基因能显著抑制细胞的迁移、阻滞细胞周期,SRPX2基因可能成为肺腺癌治疗的新靶点.
含Sushi重复蛋白X连锁2、基因敲除、肺腺癌、A549细胞、生物学特性
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R734.2(肿瘤学)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目LHGJ20191375
2022-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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901-906
