欧当归内酯A对人胶质瘤细胞U251细胞凋亡及自噬的影响
目的 探讨欧当归内酯A(LA)对人胶质瘤细胞U251凋亡及自噬的影响.方法 将对数生长期的U251细胞随机分为空白组、30μmol·L-1 LA组、60μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA组,分别用含有0、30、60、90μmol·L-1的LA培养基培养24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测4组细胞的增殖能力,应用流式细胞术检测4组细胞培养24 h时的细胞凋亡率.将对数生长期的U251细胞分为空白组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、90μmol·L-1 LA组、30μmol·L-1 LA+3-MA组、60μmol·L-1 LA+3-MA组、90μmol·L-1 LA+3-MA组,空白组不加LA和3-MA,其余5组分别加入含0、90、30、60、90μmol·L-1 LA和1、0、1、1、1 mmol·L-13-MA的培养基培养24 h,采用CCK-8检测各组细胞活性.应用Western blot法检测空白组、30μmol·L-1 LA组、60μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA组细胞中p53、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、微管相关蛋白1 A/1 B-轻链3抗体(LC3)-Ⅰ及LC3-Ⅱ蛋白相对表达量.结果 培养24、48、72 h时,30μmol·L-1 LA组、60μmol·L-1 LA组和90μmol·L-1 LA组的细胞增殖能力显著低于空白组,60μmol·L-1 LA组和90μmol·L-1 LA组细胞增殖能力显著低于30μmol·L-1 LA组,90μmol·L-1 LA组细胞增殖能力显著低于60μmol·L-1 LA组(P<0.05).空白对照组培养24、48、72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05).30μmol·L-1 LA组培养72 h时的细胞增殖能力显著高于培养24、48 h时(P<0.05),培养24 h与48 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);60μmol·L-1 LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时(P<0.05),培养48 h与72 h时的细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05).90μmol·L-1 LA组培养48、72 h时的细胞增殖能力显著低于培养24 h时,培养72 h时的细胞增殖能力显著低于48 h时(P<0.05).30μmol·L-1 LA组、60μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA组细胞凋亡率显著高于空白组,60μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA组细胞凋亡率显著高于30μmol·L-1 LA组(P<0.05);60μmol·L-1 LA组与90μmol·L-1 LA组细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05).90μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA+3-MA组细胞活性低于空白组、3-MA组、30μmol·L-1 LA+3-MA组和60μmol·L-1 LA+3-MA组,90μmol·L-1 LA组细胞活性低于90μmol·L-1 LA+3-MA组(P<0.05);空白组、3-MA组、30μmol·L-1 LA+3-MA组和60μmol·L-1 LA+3-MA组细胞活性比较差异无统计学意义(P>0.05).30μmol·L-1 LA组、60μmol·L-1 LA组和90μmol·L-1 LA组U251细胞中p53和Bax蛋白相对表达量高于空白组,30μmol·L-1 LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量低于空白组,90μmol·L-1 LA组U251细胞中Bcl-2蛋白相对表达量低于空白组,90μmol·L-1 LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量高于空白组(P<0.05);30μmol·L-1 LA组和60μmol·L-1 LA组U251细胞中Bcl-2蛋白相对表达量及60μmol·L-1 LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05).90μmol·L-1 LA组U251细胞中p53、Bcl-2蛋白相对表达量低于30μmol·L-1 LA组和60μmol·L-1 LA组,90μmol·L-1 LA组U251细胞中Bax、caspase-3蛋白相对表达量高于30μmol·L-1 LA组,90μmol·L-1 LA组U251细胞中caspase-3蛋白相对表达量高于60μmol·L-1 LA组(P<0.05).90μmol·L-1 LA组与60μmol·L-1 LA组U251细胞中Bax蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).60μmol·L-1 LA组U251细胞中Bax、caspase-3蛋白相对表达量高于30μmol·L-1组(P<0.05).60μmol·L-1 LA组与30μmol·L-1组U251细胞中p53、Bcl-2蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).4组U251细胞中LC3-Ⅰ蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).60μmol·L-1 LA组、90μmol·L-1 LA组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著高于空白组和30μmol·L-1 LA组(P<0.05);30μmol·L-1 LA组与空白组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较差异无统计学意义(P>0.05);60μmol·L-1 LA组与90μmol·L-1 LA组U251细胞中LC3-Ⅱ蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 LA能够通过增加凋亡蛋白p53、Bax、caspase-3和减少Bcl-2蛋白的表达,以及增加自噬蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达,抑制U251细胞增殖,促进U251细胞凋亡和自噬.
胶质瘤细胞、欧当归内酯A、凋亡、自噬
39
R739.41(肿瘤学)
山东省医药卫生科技发展计划项目2019WS125
2022-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
201-207
