激活转录因子3对巨噬细胞M2型极化的影响及其机制
目的 研究激活转录因子3(ATF3)对巨噬细胞M2型极化的影响及其机制.方法 取对数生长期RAW264.7细胞,接种至6孔板中,将细胞分为对照组、M1组和M2组;对照组细胞未做任何处理,M1组细胞用干扰素-γ(10μg·L-1)和脂多糖(10μg·L-1)诱导6 h,M2组细胞用白细胞介素(IL)-4(15μg·L-1)诱导48 h.采用荧光实时定量聚合酶链反应法检测对照组、M1组、M2组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA表达水平,采用Western blot法检测3组RAW264.7细胞中ATF3、信号传导及转录激活蛋白(STAT3)及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的相对表达量.另取对数生长期RAW264.7细胞分为对照组、空白转染组、M2对照组、M2 ATF3转染组;对照组细胞未做任何处理,空白转染组细胞转染空白小干扰RNA(siRNA),M2组细胞用IL-4(15μg·L-1)诱导48 h,M2 ATF3转染组细胞用IL-4(15μg·L-1)诱导48 h,然后转染ATF3 siRNA序列.采用荧光实时定量聚合酶链反应检测对照组、空白转染对照组、M2组、M2 ATF3转染组RAW264.7细胞中ATF3、IL-10及转化生长因子-β(TGF-β)mRNA相对表达量,采用Western blot检测4组RAW264.7细胞中ATF3、精氨酸酶-1(Arg-1)、STAT3及p-STAT3蛋白的相对表达量.结果 M2组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA及ATF3、p-STAT3蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.05);M1组与对照组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA及ATF3、p-STAT3蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);M1组、M2组RAW264.7细胞中STAT3蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).M2对照组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA及蛋白相对表达量均显著高于对照组和空白转染组(P<0.05);M2 ATF3转染组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA及蛋白相对表达量均显著低于M2对照组(P<0.05);其余各组RAW264.7细胞中ATF3 mRNA及蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05).M2对照组RAW264.7细胞中Arg-1、p-STAT3蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.05);M2 ATF3转染组RAW264.7细胞中Arg-1、p-STAT3蛋白相对表达量均显著低于M2对照组(P<0.05).其余各组RAW264.7细胞中Arg-1、STAT3及p-STAT3蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05).M2对照组RAW264.7细胞中IL-10、TGF-βmRNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.05);M2 ATF3转染组RAW264.7细胞中IL-10、TGF-βmRNA相对表达量均显著低于M2对照组(P<0.05).其余各组RAW264.7细胞中IL-10、TGF-βmRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 ATF3可能通过STAT3信号通路调节巨噬细胞向M2型极化.
巨噬细胞极化;激活转录因子3;信号传导与转录激活因子3
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R392.5
2021-11-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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