奥希替尼联合人参皂苷Rg3对非小细胞肺癌H1975细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨奥希替尼联合人参皂苷Rg3对非小细胞肺癌H1975细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 将对数生长期的H1975细胞随机分为人参皂苷Rg3组、奥希替尼组、奥希替尼+人参皂苷Rg3组和对照组,每组设5个复孔.人参皂苷Rg3组细胞使用终质量浓度为15.0mg·L-1人参皂苷Rg3干预,奥希替尼组细胞使用0.1μmol·L-1奥希替尼干预,奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞使用0.1μmol·L-1奥希替尼和终质量浓度为15.0mg·L-1人参皂苷Rg3干预,对照组细胞加入等量的磷酸盐缓冲溶液.采用Hoechst33342染料染色各组细胞,观察药物干预48h时各组细胞形态变化;采用甲基噻唑基四唑法检测药物干预24、48、72h时各组细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测药物干预48h时各组细胞凋亡和细胞周期分布情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测药物干预48h时各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、caspase-3mRNA相对表达量,采用Western blot法检测药物干预48h时各组细胞中PI3K、Akt、caspase-3、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量.结果 药物干预48h时,对照组细胞形态正常,人参皂苷Rg3组、奥希替尼组、奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞均出现核固缩、染色质凝集、核碎裂,部分出现凋亡小体,其中奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞形态变化最为明显,奥希替尼组次之,人参皂苷Rg3组细胞形态变化最轻.药物干预24、48、72h时,人参皂苷Rg3组、奥希替尼组、奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞增殖抑制率均显著高于对照组(P<0.05).人参皂苷Rg3组、奥希替尼组、奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞增殖抑制率随干预时间延长均显著升高,各时间点间增殖抑制率差异均有统计学意义(P<0.05).药物干预48h时,各药物干预组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞凋亡率显著高于人参皂苷Rg3组(P<0.05);奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞凋亡率显著高于奥希替尼组(P<0.05).药物干预48h时,与对照组相比,人参皂苷Rg3组G0/G1期细胞占比升高,G2期细胞占比降低(P<0.05);奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组G0/G1期、G2期细胞占比均降低,S期细胞占比均升高(P<0.05);与人参皂苷Rg3组相比,奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组G0/G1期、G2细胞占比均降低,S期细胞占比均升高(P<0.05);奥希替尼+人参皂苷Rg3组G2期细胞占比显著低于奥希替尼组(P<0.05).药物干预48h时,人参皂苷Rg3组、奥希替尼组、奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞中caspase-3mRNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.05),奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞中caspase-3mRNA相对表达量均显著高于人参皂苷Rg3组(P<0.05),奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞中caspase-3mRNA相对表达量显著高于奥希替尼组(P<0.05);各组细胞中PI3K、Akt mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05).药物干预48h时,人参皂苷Rg3组、奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞中caspase-3蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著低于对照组(P<0.05);奥希替尼组和奥希替尼+人参皂苷Rg3组细胞中caspase-3蛋白相对表达量均显著高于人参皂苷Rg3组,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著低于人参皂苷Rg3组(P<0.05);奥希替尼+人参皂苷Rg3组中caspase-3蛋白相对表达量显著高于奥希替尼组(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt显著低于奥希替尼组(P<0.05).结论 奥希替尼联合人参皂苷Rg3可有效抑制非小细胞肺癌H1975细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关.

关键词：奥希替尼、人参皂苷Rg3、非小细胞肺癌、增殖、凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：2018年河南省科技攻关项目编号:182102310314

在线出版日期：2021-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1007-1012,1017