沉默长链非编码RNA Linc00839对神经母细胞瘤SH-SY5 Y细胞增殖的影响
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)Linc00839对神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞增殖的影响及其机制.方法 取对数生长期NB SH-SY5Y细胞,分为干扰组、空载组,采用脂质体转染法分别将Linc00839-小分子干扰RNA(siRNA)、阴性对照siRNA转染至干扰组、空载组SH-SY5Y细胞,另取不作处理的SH-SY5Y细胞设为空白组.采用荧光显微镜观察各组细胞转染效率,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定转染后空载组、干扰组细胞Linc00839表达情况;采用二甲基噻唑法测定各组细胞增殖情况;采用流式细胞术测定各组细胞周期分布情况;采用qRT-PCR法测定转染72 h后各组细胞β-catenin、c-myc、cyclin D1 mRNA相对表达量;采用Western blot法测定转染72 h后各组细胞c-myc、cyclin D1、β-catenin、p-β-catenin蛋白相对表达量,并比较p-β-catenin/β-catenin.结果 空载组、干扰组细胞转染效率分别为(82.45±8.63)％、(83.04±8.79)％,2组细胞转染效率比较差异无统计学意义(P>0.05).转染后干扰组细胞Linc00839 mRNA相对表达量显著低于空白组、空载组(P<0.01);空载组细胞Linc00839 mRNA相对表达量与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05).干扰组细胞培养32、56、80 h时的增殖能力显著弱于空白组和空载组(P<0.05);空载组细胞培养32、56、80 h时的增殖能力与空白组比较差异均无统计学意义(P>0.05).空白组、空载组、干扰组细胞培养56、80 h时的增殖能力显著强于32 h(P<0.05),培养80 h时的增殖能力显著强于56 h(P<0.05).干扰组细胞G0/G1期细胞比例显著高于空白组、空载组(P<0.05),S、G2/M期细胞比例显著低于空白组、空载组(P<0.05);空载组细胞G0/G1、S、G2/M期细胞比例与空白组比较差异均无统计学意义(P>0.05).干扰组细胞c-myc、cyclin D1 mRNA相对表达量显著低于空白组、空载组(P<0.05);空载组细胞c-myc、cyclin D1 mRNA相对表达量与空白组比较差异均无统计学意义(P<0.05);3组细胞 β-catenin mRNA相对表达量组间比较差异无统计学意义(P>0.05).3组细胞β-catenin蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).干扰组细胞c-myc、cyclin D1、p-β-catenin蛋白相对表达量及p-β-catenin/β-catenin低于空白组、空载组(P<0.05);空载组细胞c-myc、cyclin D1、β-catenin蛋白相对表达量及p-β-catenin/β-catenin与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 沉默Linc00839可抑制NB SH-SY5Y细胞增殖,其调控机制可能与抑制 β-catenin磷酸化、下调c-myc、cyclin D1 mRNA及蛋白表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.
神经母细胞瘤、长链非编码RNA、Linc00839、细胞增殖
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R739.4(肿瘤学)
河南省高等学校重点科研项目编号:18A310001
2020-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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