多发性骨髓瘤细胞中ZNF382甲基化状态及其意义
目的 研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓细胞和U266细胞株中ZNF382的表达及其在启动子区的甲基化状态.方法 选择2018年1～6月洛阳市中心医院收治的6例MM患者(MM组)和6例缺铁性贫血患者(对照组),抽取2组患者骨髓细胞并选择生长状态良好的MM细胞系U266细胞,分别采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法检测MM组、对照组患者骨髓细胞及U266细胞中ZNF382 mRNA和蛋白表达,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MM组、对照组患者骨髓细胞及U266细胞中ZNF382基因启动子区甲基化状态.将U266细胞分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、5μmol · L-1地西他滨(DAC)组和10 μmol · L-1 DAC组,应用RT-PCR检测4组细胞中ZNF382 mRNA表达水平,采用MSP检测空白对照组、5μmol·L-1 DAC组和10 μmol·L-1 DAC组细胞中ZNF382基因启动子区甲基化状态.取生长状态良好的U266细胞分为空白对照组、空载质粒转染组和ZNF382转染组,空白对照组细胞正常培养,不添加任何类型慢病毒,空载质粒转染组细胞转染空载质粒慢病毒,ZNF382转染组细胞转染过表达ZNF382慢病毒,筛选稳定表达ZNF382的U266细胞,并应用细胞计数试剂盒-8和流式细胞术检测U266细胞增殖和凋亡情况.结果 MM组患者骨髓细胞和U266细胞中ZNF382 mRNA及蛋白的表达低于对照组患者骨髓细胞(P＜0.05).MM组患者骨髓细胞及U266细胞中ZNF382基因启动子区甲基化水平明显高于对照组患者骨髓细胞(P＜0.05).空白对照组和DMSO组U266细胞中ZNF382 mRNA表达比较差异无统计学意义(P＞0.05);与空白对照组和DMSO组比较,5、10μmol·L-1DAC组U266细胞中ZNF382 mRNA表达水平增加(P＜0.05);10 μmol·L-1DAC组U266细胞中ZNF382 mRNA表达水平高于5μmol·L-1 DAC组(P＜0.05).与空白对照组比较,5、10μmol·L-1DAC组细胞中ZNF382启动子区甲基化水平降低(P＜0.05);5μmol·L-1 DAC组和10 μmol·L-1 DAC组细胞中ZNF382启动子区甲基化水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).转染24、48、72 h后,空载质粒转染组与空白对照组U266细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P＞0.05);ZNF382转染组U266细胞增殖能力低于空白对照组与空载质粒转染组(P＜0.05).空白对照组与空载质粒转染组U266细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P＞0.05),ZNF382转染组U266细胞凋亡率高于空载质粒转染组和空白对照组(P＜0.05).结论 ZNF382基因启动子区高甲基化可能是引起MM患者骨髓细胞及细胞株U266中ZNF382表达降低的重要原因,ZNF382能够有效抑制U266细胞的增殖并促进其凋亡.
多发性骨髓瘤、ZNF382、甲基化
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R733.3(肿瘤学)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目;洛阳市科技计划医疗卫生项目
2020-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
611-616,621
