ω-3多不饱和脂肪酸对对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

摘要：

目的 探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及机制.方法 选取健康C57BL/6雌性野生型小鼠(WT组)和Fat-1转基因雌性小鼠(Fat-1组)各24只,采用腹腔注射APAP法建立小鼠急性肝损伤模型,分别于APAP腹腔注射后0、2、6、24h应用CO2法每组处死6只小鼠,采集小鼠肝组织和静脉血.应用丙氨酸转氨酶(ALT)检测试剂盒测定小鼠血清ALT水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝组织形态学变化,Western blot法检测小鼠肝组织中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)水平.取HepaRG细胞,应用APAP孵育6h诱导HepaRG细胞凋亡,换培养液后将细胞分为APAP+二十二碳六烯酸(DHA)组和APAP+二甲基亚砜(DMSO)组,APAP+ DHA组在培养基中加入DHA,APAP+ DMSO组在培养基中加入DMSO;分别于处理0、3、6h时收集HepaRG细胞,采用Westem blot法检测HepaRG细胞中AMPK和p-AMPK表达水平.取HepaRG细胞并随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)+DHA组、PBS+DMSO组、APAP+DHA组和APAP+DMSO组,APAP+ DHA组和APAP+ DMSO组细胞应用APAP孵育6h诱导HepaRG细胞凋亡,PBS+ DHA组和PBS+ DMSO组细胞加入PBS;换培养液后,APAP+ DHA组和PBS+ DHA组在培养基中加入DHA,APAP+ DMSO组和PBS+ DMSO组在培养基中加入DMSO;各组细胞继续温箱孵育6h,收集细胞,采用流式细胞术检测各组HepaRG细胞凋亡情况.结果 2组小鼠腹腔注射APAP后2、6、24 h时血清ALT水平显著高于0h时(P＜0.05);腹腔注射APAP后2、6、24 h时,Fat-1组小鼠血清ALT水平显著低于WT组(P＜0.05).HE染色结果显示,腹腔注射APAP后24h WT组小鼠肝细胞呈现不同程度的变性或坏死,细胞核溶解或固缩,肝细胞索正常形态被破坏并伴有明显的炎性细胞浸润;而Fat-1组小鼠肝脏组织病变较轻.腹腔注射APAP后2、6h时Fat-1组小鼠肝组织中p-AMPK相对表达量显著高于WT组(P＜0.05);WT组小鼠腹腔注射APAP后2、6h时肝组织中p-AMPK相对表达量显著低于0h时(P＜0.05),Fat-1组小鼠腹腔注射APAP后0、2、6h时肝组织中p-AMPK相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).腹腔注射APAP后0、2、6h时2组小鼠肝组织中AMPK相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).APAP+ DHA组HepaRG细胞处理3、6h时p-AMPK相对表达量显著高于APAP+ DMSO组(P＜0.05),APAP+ DHA组和APAP+ DMSO组HepaRG细胞处理3、6h时p-AMPK相对表达量显著低于0h时(P＜0.05);APAP+ DHA组和APAP+ DMSO组HepaRG细胞处理0、3、6h时AMPK相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).APAP+ DMSO组、APAP+DHA组HepaRG细胞凋亡率均显著高于PBS+ DMSO组和PBS+ DHA组(P＜0.05),APAP+ DHA组HepaRG细胞凋亡率显著低于APAP+ DMSO组(P＜0.05),PBS+ DMSO组与PBS+ DHA组HepaRG细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ω-3PUFA对APAP诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用,其机制可能与ω-3PUFA促进AMPK通路活化有关.

关键词：多不饱和脂肪酸、对乙酰氨基酚、急性肝损伤、腺苷酸激活蛋白激酶

所属期刊栏目：36

分类号：R965(药理学)

在线出版日期：2019-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：506-510,516