高效液相色谱荧光法检测血浆中硫醇物的方法学研究
目的 建立一种可同时测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy)、谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸(Cys)及半胱氨酸甘氨酸(CysGly)的总量及其游离型和还原型浓度的高效液相色谱(HPLC)荧光检测方法.方法 采用C-18柱分离,柱温25℃,激发波长330 nm,发射波长380 nm,流动相采用梯度洗脱,以三羧基乙基膦(TCEP)为还原剂,N-1-苯基-马来酰亚胺(NPM)为衍生剂建立HPLC荧光检测方法.将建立的HPLC荧光检测方法用于测量尿毒症患者和健康人群血浆中各种类型硫醇物浓度.结果 总量和游离型Hcy、GSH、Cys和CysGly线性范围分别为1.0~120.0、2.0~80.0、10.0~1500.0和3.0~240.0μmol·L-1,还原型Hcy、GSH、Cys和CysGly线性范围分别为1.25~50.00、0.10~8.00、1.25~50.00和0.01~4.00μmol·L-1;日内和日间变异均小于5%,回收率在80.1% ~111.7%.该方法成功应用于34例尿毒症患者和32例健康人血浆中GSH、Cys、Hcy和CysGly的总量、游离型及还原型浓度的测定.结论 建立了一种新的可同时测定血浆中Hcy、GSH、Cys及CysGly的HPLC荧光检测方法,该方法准确可靠.
尿毒症、硫醇物、高效液相色谱法
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R33-33(人体生理学)
国家自然科学基金资助项目81200294
2018-07-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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