肾癌转移相关基因CXC趋化因子受体4核定位信号的结构分析与功能鉴定
目的 分析肾癌转移相关基因CXC趋化因子受体4(CXCR4)核定位信号序列的组成结构,并鉴定其功能.方法 首先通过生物信息学方法检索Ensembl和PSORTⅡPrediction在线数据库,分析CXCR4核定位信号序列的组成和结构.然后根据生物信息学分析结果,通过重叠延伸聚合酶链反应和基因克隆技术构建含有CXCR4核定位信号序列突变基因与绿色荧光蛋白基因的融合基因质粒,并将其转染入肾癌细胞表达,在荧光和激光共聚焦显微镜下观察CXCR4核定位信号序列突变体蛋白的亚细胞分布情况.结果 CXCR4蛋白的核定位信号序列为其第146 ~149位氨基酸,组成为精氨酸-脯氨酸-精氨酸-赖氨酸(RPRK).荧光和激光共聚焦显微镜下,核定位信号序列突变的CXCR4蛋白分布于肾癌细胞膜和细胞质,不再分布于细胞核,而野生型CXCR4蛋白除细胞膜和细胞质外,仍可分布于肾癌细胞核.结论 CXCR4蛋白的核定位信号序列确为其第146 ~ 149位氨基酸,该突变序列中任一碱性氨基酸位点均可导致CXCR4核分布能力丧失.
肾细胞癌、CXC趋化因子受体4、亚细胞分布、核分布
34
R737.11(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目编号:81272817.
2017-03-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
86-89