小干扰RNA抑制内源性原癌基因c-myc表达对鼻咽癌细胞5-8F的影响

摘要：

目的 通过RNA干扰抑制鼻咽癌5-8F细胞内源性原癌基因c-myc的过表达,观察c-myc过表达受到抑制后对5-8F细胞生物学特性的影响.方法 构建针对c-myc的小干扰RNA (siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM 2000脂质体转染5-8F细胞,建立稳定转染干扰组细胞5-8F/si-c-myc;同法建立阴性对照组细胞5-8F/si-control,并以5-8F为空白对照组细胞;通过半定量反转录聚合酶链反应和Western blot分别检测c-myc mRNA和蛋白水平表达,鉴别干扰效果;通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测干扰前后对5-8F细胞生长的影响;通过流式细胞仪分析干扰前后对5-8F细胞周期的影响;通过透射电镜扫描观察干扰前后对5-8F细胞超微结构的影响.结果 与空白对照组和阴性对照组细胞相比,干扰细胞组c-myc mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P＜0.05),细胞生长活力显著降低(P＜0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例显著升高(P＜0.05),S期细胞比例显著降低(P＜0.05),细胞超微结构发生明显改变.结论 干扰内源性c-myc的siRNA能显著抑制5-8F的细胞生长和细胞分裂增殖,c-myc基因有可能成为鼻咽癌基因治疗新靶点.

关键词：RNA干扰、原癌基因c-myc、细胞生长、5-8F细胞、鼻咽癌

所属期刊栏目：32

分类号：R739.6(肿瘤学)

在线出版日期：2015-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：614-618